細(xì)胞培養(yǎng)常遇問(wèn)題集錦（八）

本期同樣收集了一些案例，和大家分享，希望大家在科研路上可以少走彎路。

36、

▲問(wèn)：細(xì)胞之間的，到底是細(xì)胞碎片還是污染？加雙抗了。

答：確定是污染，極大概率是細(xì)菌污染，加雙抗有可能有抗性了。基礎(chǔ)培養(yǎng)基是不含雙抗的，因?yàn)殡p抗4度下長(zhǎng)期儲(chǔ)存會(huì)降低活性。

37、

問(wèn)：做脂肪來(lái)源間充質(zhì)干細(xì)胞，要怎么提取？

答：可以使用原代干細(xì)胞分離液進(jìn)行提取。

38、

▲問(wèn)：這個(gè)背景臟兮兮的，怎么處理，生長(zhǎng)還好，用的高糖DMEM  L929

答：這個(gè)細(xì)胞看起來(lái)不夠飽滿，也不透亮，形態(tài)不規(guī)則，棱角不分明，狀態(tài)不算好，是不是營(yíng)養(yǎng)體系有的東西換了，建議換回來(lái)，推薦1640。

39、

▲問(wèn)：是人肺成纖維細(xì)胞，剛復(fù)蘇的細(xì)胞，有很多亮點(diǎn)，不知道怎么回事，已經(jīng)復(fù)蘇過(guò)夜了，一直有亮點(diǎn)存在。

答：亮點(diǎn)是沒(méi)貼壁的細(xì)胞。

40、

問(wèn)：人的皮膚成纖維細(xì)胞如何分離？人的皮膚組織是不是不容易獲取？科研用的，一般需要多大一塊皮膚組織？

答：試試組織直接培養(yǎng)的方法；科研的話，需要從正規(guī)醫(yī)院獲取，并簽署供者知情同意書(shū)。組織培養(yǎng)法是可以培養(yǎng)出來(lái)表皮干細(xì)胞的，但是數(shù)量有限，傳代也不好傳。少量可以提取，大規(guī)模提取效果不佳。2*2厘米的皮膚組織就可以提取出細(xì)胞。

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